Características clínicas y epidemiológicas de la infección por rotavirus en niños de Cumaná, Venezuela / Clinical and epidemiological characteristics of rotavirus infection in children of Cumaná, Venezuela

Se estudió la tasa de detección de rotavirus humano del grupo A (RVH-A), así como su asociación con la clínica y epidemiología, en niños menores de 5 años con diarrea aguda que acudieron al Hospital Universitario “Antonio Patricio de Alcalá”, Cumaná, Venezuela, entre marzo de 2006 y septiembre de 2007. De 241 muestras fecales colectadas en este estudio, 47 (19,5%) resultaron positivas a RVH-A por ensayo inmunoenzimático y estuvieron presentes durante los 19 meses de estudio, con picos de mayor tasa de detección en los meses de marzo, abril y mayo (30,0%, 28,6% y 43,8%, respectivamente) de 2006 y septiembre (37,5%) de 2007. El 34% de los casos ocurrió en el grupo etario de 7 a 12 meses, y los varones fueron los más afectados (55,3%), así como las clases socioeconómicas obrera y marginal (72,4%). Los niños que recibieron alimentación no materna fueron mayormente infectados por RVH-A (61,7%). Se observó que la mayoría de los niños (72,3%) presentaron de 1 a 4 evacuaciones diarias, casi todas (83,0%) entre semilíquidas y líquidas, pero con pocos vómitos (38,2%) y muy pocos casos con fiebre (10,6%), sin embargo la deshidratación si resultó ser un síntoma significativo (OR=6,307; IC-95%=2,337-21,4; p = 0,0001) en los niños enfermos. Al comparar estos resultados con los de otros trabajos previos en la misma zona, se notó una disminución de la tasa de detección de RVH-A de más del doble, y los síntomas clínicos de la enfermedad rotaviral son los mismos reportados por otros autores. De 32 niños vacunados contra rotavirus, en 30 (93,8%) no se les detectó RVH-A en sus heces, y hubo una asociación significativa (OR=0,02434, IC-95%=0,0377-0,9171; p=0,037) entre los niños vacunados y la protección.

The detection rate of group A human rotavirus (HRV-A), as well as its association with clinical and epidemiological parameters, was studied in children younger than 5 years old with acute diarrhea attending to the University Hospital “Antonio Patricio de Alcalᔠof Cumaná, between march 2006 and september 2007. Of 241 fecal samples collected in this study, 47 (19.5%) were positive to HRV-A by immunoassay. Rotavirus were present throughout the study and the major detection rates were on march, april and may of 2006 (rates were 30,0%, 28,6% y 43,8%, respectively) and september of 2007 (37,5%). Thirty four percent of cases with HRV-A occurred in children of 7 - 12 months and males were the most affected (55.3%), as well as the worker and marginal socioeconomic classes (72,4%). Children that not received maternal feeding were the group mainly infected by HRV-A (61.7%). Most of the children (72.4%) had one to four evacuations/day, with few vomits (38.2%) and fever (10.6%). Almost all the feces (83.0%) had a liquid or semi-liquid aspect. When these results were compared with previous data of the same geographic area, we observed a two-fold decrease of the detection rate of HRV-A and the clinical symptoms were the same as reported by other authors. Of 32 children vaccinated against rotavirus, 30 (93.8%) did not have HVR-A in their feces and there was a significant association between the vaccinated children and protection.

Indicadores bacterianos en los mejillones Perna perna (Linné, 1758) y P. viridis (Linné, 1758) y en las aguas de extracción de bivalvos procedentes de la costa norte y sur del estado Sucre Venezuela / Bacterial indicators in the mussels, Perna perna (Linné, 1758) and P. viridis (Linné, 1758) and in bivalve extraction waters, from the northern and southern coasts of Sucre state Venezuela

Se evaluó la calidad sanitaria de los mejillones Perna perna y P. viridis, así como de las aguas de extracción en tres zonas de producción del estado Sucre, Venezuela. Se realizaron doce muestreos entre agosto 2003 a agosto 2004. En las muestras de agua se determinó la carga (NMP/100 ml) de coliformes totales (CT) y coliformes fecales (CF), mientras que a los mejillones se les realizó recuento en placa de aerobios mesófilos (AM), carga de CF (NMP/g) y Escherichia coli, además de la detección de Salmonella spp. In situ se midió la temperatura superficial del agua, salinidad y oxígeno disuelto. El agua de las zonas de Bahía Iglesia y Punta Patilla cumplió con los criterios de CT y CF (legislación venezolana y FDA-EUA), no así la procedente de la Ensenada La Chica, en donde se obtuvo para los meses de noviembre y diciembre, valores máximos de los mismos grupos, que fueron comparativamente con los límites establecidos. Los recuentos de AM en mejillones cumplieron con los criterios microbiológicos para su comercialización establecidos por la FDA-EUA. Los mejillones procedentes de la Ensenada La Chica mostraron contaminación, ya que los CF y E. coli mostraron la cifra de los 230 NMP/g (limite permitido). Solo en una oportunidad (marzo 2004) en Bahía Iglesia, se encontraron altas cargas bacterianas en el mejillón (1,1x104 NMP/g de CF y E. coli). Se detectó Salmonella en la Ensenada La Chica solamente en octubre. No se encontró correlación entre las variables físico-químicas y las poblaciones bacterianas evaluadas. Se recomienda realizar monitoreos mensuales del agua y los mejillones para que estas zonas de producción de mejillones puedan ser clasificadas y certificadas correctamente.

The sanitary quality of the mussels, Perna perna and P. viridis, was evaluated, as well as that of the water in three zones of extraction in Sucre State, Venezuela. Twelve samplings were made between August 2003 and August 2004. In water samples, the total coliforms (TC) and fecal coliforms (FC) load were determined (MPN/100 ml), while in mussel samples a plate count of aerobial mesophils (AM), load of FC (MPN/g) and Escherichia coli were made, besides detection of Salmonella spp. In situ, the surface water temperature, salinity and dissolved oxygen were measured. Waters from Bahía Iglesia and Punta Patilla met the criteria for TC and FC (according to the Venezuelan legislation and FDA-USA), but that from Ensenada La Chica during November and December did not, since the maximum values for these two groups were comparatively higher than the allowed limits. The bacterial counts of mussels from the former two areas met the microbiological criteria for commercialization, but those from Ensenada La Chica showed an elevated contamination, since FC and E. coli surpassed the value of 230 MPN/g (allowed limit). Only in one opportunity (March, 2004) at Bahía Iglesia there was high bacterial load in mussels (1.1x104 MPN/g of FC and E. coli). Salmonella was only detected in Ensenada La Chica in October. No relationship was found between the physical and chemical variables and the evaluated bacterial loads. A periodical monitoring of water and mussels is recommended in order to have a correct classification and certification of the mussel extraction zones.

Detección molecular de Escherichia coli productor de shiga toxina (Stx1) y rotavirus en heces de niños con diarrea / Molecular detection of shiga toxin-producing (stx1) Escherichia coli and rotavirus in stoolos of children with diarrhea

Se investigó la presencia de E. coli productora de shiga toxina y rotavirus en heces de 90 niños diarreicos con edades comprendidas entre 0 y 3 años. De cada muestra se tomaron tres alícuotas: una se sometió a enriquecimiento previo para E. coli O157, con otra se hizo siembra directa en placas con agar MacConkey-Sorbitol y Rojo Eosina con MUG y la ultima se congeló a –70°C para el análisis posterior de rotavirus. La búsqueda de E. coli O157 se realizó por inmunocromatografía in vitro de Coris Bioconcept (Bélgica) y O157:H7 por serología con antisueros FUVESIN. La presencia del antígeno O157 (rbfO157) y de los genes que codifican para las shiga toxinas (stx1 y stx2) se determinó por PCR. Los rotavirus se detectaron por electroforesis en geles de poliacrilamida. Las 90 muestras de heces analizadas resultaron negativas para el antígeno O157 y para O157:H7. La PCR corroboró que 9 cepas sospechosas aisladas de los medios de cultivos, eran cepas STEC no O157 y portadoras del gen stx1, mostrando un 10% de positividad. La electroforesis para el ARN viral detectó rotavirus en 21 (23,33%) muestras. Se confirma el predominio de rotavirus y se sugiere que la circulación de cepas STEC no 0157, es un indicio de la participación de estas cepas en la etiología de las diarreas agudas.

Aislamiento e identificación por métodos convencionales y PCR de Listerua monocytogenes en quesos blancos frescos comercializados en Cumaná Venezuela / Isolation and identification by convetional and PCR methods of Listeria monocytogenes in fresh white cheeses commercialized in Cumaná Venezuela

El queso artesanal es uno de los alimentos que tiene poca supervisión sanitaria durante su elaboración y comercialización. Como se ha visto involucrado en brotes de ETA en Venezuela, y en otros países está asociado a listeriosis, en el presente trabajo se investigó la presencia de Listeria monocytogenes en quesos frescos que se expenden en comercios públicos y municipales de Cumaná. Se analizaron 60 muestras de quesos frescos determinándose los porcentajes de NaCl y pH. El aislamiento y caracterización bioquímicade las cepas de Listeria spp se realizaron según la FDA y API Listeria y molecularmente por PCR Los valores de pH oscilaron entre 3,81 y 7,10 con un promedio de 5,87, el porcentaje de NaCl osciló entre 0,58 y 7,60, con media 2,20. Diez muestras fueron positivas por pruebas bioquímicas convencionales y API Listeria para el genero Listeria. En la confirmación por PCR, se identificaron 2 L. monocytogenes, 2 positivas para el grupo L.welshimeri- L.selligeri-L.ivanovii y 5 cepas identificadas como L. innocua y 1L.grayi Las dos L. monocytogenes, fueron positivas para gen de la listeriolisina (hly). Los datos aportan evidencia de fallas en la elaboración de los quesos artesanales por la gran dispersión en los valores de NaCl y pH, además con este estudio se confirma que Listeria monocytogenes puede encontrarse contaminando alimentos de alto consumo en el país.

The artisan venezuelan cheese is a food that does not have sanitary supervision during its elaboration and sale. This food has been associated with outbreaks of infections diseases in Venezuela and especially listeriosis in North America and Europe, thereby, it was investigated the presence of Listeria monocytogenes in this kind of cheese that is commercialized in municipal and public markets of Cumaná. Sixty samples of fresh white cheese were analyzed to determine its NaCL content and pH values. The isolation and biochemical characterization were carried out by FDA standars and API Listeria, and the molecular identification by PCR. The pH values were in the range 3.81-7.10, mean 5.87. The NaCl percentages were in the range, 0.58-7.60 mean 2.20. Ten samples of cheese were positive for Listeria spp by biochemical test and API Listeria PCR confirmation were identified 2 Listeria monocytogenes, 2 L. welshimeri- L. selligeri- L ivanovii group, 5 L. innocua and one L grayi. The L. monocytogenes strains were positive for listeriolisin gene (hly). These results show evidence of failures in the elaboration of this artisan cheese due to great dispersion of NaCl and pH values, and confirm the presence Listeria monocytogenes in this kind of food.

Evaluación microbiológica en manipuladores de alimentos de tres comedores públicos en Cumana - Venezuela

Se evaluó la calidad microbiológica de los manipuladores de alimentos de tres comedores colectivos de la ciudad de Cumaná. Se analizaron muestras de manos por contacto directo en agar Vogel-Jhonson (Merck) para la detección de S. aureus y en agar McConkey (Merck) y SS (Merck) para la detección de enterobacterias. Muestras nasales se utilizaron para la detección de S. aureus en placas con agar Baird-Parker (Merck) y muestras de heces para la observación de parásitos y la detección de E. coli enteropatógena. Los promedios de UFC/cm² de Staphylococcus spp. en las manos de los manipuladores fueron estadísticamente significativo. S. aureus termonucleasa positiva fue identificado en 13,3% de las muestras de manos y 33,3% en muestras nasales. Enterobacter cloacae seguida de E. coli fueron las especies con mayor aislamiento en muestras de manos. Blastocystis hominis se encontró en 18,33% y E. coli enteropatógena en 19,56% de las muestras de heces analizadas.

The quality of food handlers of three collective dining rooms in the city of Cumaná was evaluated. Samples of hands were analyzed by direct contact in agar Vogel-Jhonson (Merck) for detection of S. aureus and in agar McConkey (Merck) and SS (Merck) for enterobacteria detection. Nasal samples were used to detect S. aureus in agar Baird-Parker (Merck) and stool samples for the observation of parasites and isolation of enteropathogenic E.coli. The results showed that the average of UFC/cm² of Staphylococcus sp. in hands was statistically significant. Termonuclease positive strains of S. aureus was identified in 13.3% of hand samples and 33.3% in nose samples. Enterobacter cloacae followed by E. coli was the species with more isolation in samples of hands. In stool samples Blastocystis hominis was identified in 18.33%, and enteropathogenic E. coli, was found in 19.56% of the analyzed samples.